细菌内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，当细胞死亡或自溶后便会释放出内毒素，如果被大量注射进入血液时可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等反应——又叫“热原反应”。因此，在注射剂中需严格控制细菌内毒素。
一、如何制定注射药品的细菌内毒素限度
①根据《中国药典2020年版》1143 细菌内毒素检查法中公式L=K/M计算得出限度，其中L为供试品的细菌内毒素限值，K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量；
②结合《中国药典2020年版》9251 细菌内毒素检查法应用指导原则要求；
③查找各国药典（如美国药典、英国药典、日本药典）以及进口注册标准收载的该产品细菌内毒素要求。
综上，选择最严格的细菌内毒素要求作为本品的限度值。
①原辅料本身的细菌内毒素在注射剂中细菌内毒素贡献占比最大，需要根据产品的细菌内毒素来计算控制原辅料的细菌内毒素。
②直接接触产品的内包材如西林瓶、胶塞、安瓿等。在产品细菌内毒素贡献占比较小。
③从容器、用具、管道和装置等带入。按照GMP规定对生产时所有接触药品的工器具等需按照要求进行清洗，并用适宜的方法除去细菌内毒素和灭菌并进行清洗验证。在产品细菌内毒素贡献占比较小。
④保存时间。药液在配制生产中，微生物可能会随时间延长而增长，进而引起细菌内毒素增加，因此需要对生产时限进行考察并进行验证，还有药品在稳定性放置期间也有可能使细菌内毒素增加，也需进行考察。
综上，在药学研发过程中我们需要重点控制原辅料带入的细菌内毒素，其他带入途径可按照现行GMP要求在生产中进行控制，原辅料带入的细菌内毒素越低，成品的细菌内毒素就越低。
热原的耐热性能良好，60℃加热 1h 不被分解破坏，100℃不降解，但 180℃ 3～4h、200℃ 60min 或 250℃ 30～45min 可使热原彻底破坏。因此耐热物品如玻璃制品、金属制品、生产过程中所用的容器和其它用具以及注射时使用的注射器等，均可采用此法破坏热原。但在通常使用的注射剂热压灭菌条件下不足以破坏热原。
热原在水溶液中可被活性炭、石棉、白陶土等吸附而除去。由于活性炭性质稳定、吸附性强兼具助滤和脱色作用，故广泛用于注射剂生产，但应注意吸附药液所造成的主药的损失。
热原分子量为 1×106 左右，体积较小，约 1～5nm，可以通过一般滤器和微孔滤膜，但采用超滤法如用 3.0～15nm 超滤膜可将其除去。
热原能溶于水但不挥发，但可随水蒸气的雾滴进入注射用水中，因此制备注射用水时，原水中的热原可经蒸馏除去，但需多次蒸馏，并加有隔沫装置，单次蒸馏往往效果不理想。
热原能被强酸、强碱、强氧化剂破坏。玻璃容器及用具如配液用玻璃器皿、输液瓶等可用重铬酸钾硫酸清洁液或稀氢氧化钠处理，破坏热原。
细菌内毒素是注射剂中重要的关键质量属性，最有效的就是控制原辅料本身带入的细菌内毒素水平，但有时对原辅料细菌内毒素要求太高，通过常规生产手段不能达到。这时，最常见的就是在原辅料或者制剂生产过程中添加超滤工序，如果超滤加在制剂端，还需要做相容性研究，比如化学兼容性、提取实验、重复使用研究等。
